產品名稱 |
人肝癌組織源性原代細胞 |
商品貨號 |
MZ-4267 |
組織來源 |
中國成年病人手術后的肝癌組織 |
規格 |
5×105cells/T25培養瓶 |
生長特性 |
貼壁 |
細胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
細胞傳代步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 |
細胞復蘇步驟 |
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。 |
細胞凍存步驟 |
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
組織學分型 |
1.彌漫型表現為均勻散在微小結節,分布于整個肝臟,結節大小較一致,一般不超過肝小 葉的大小,幾乎總是和肝硬化同時存在,肝臟正常或略小,與肝硬化不易區別,是較少見的 一型,約占原發性肝癌的5%,發展快,預后差。 2.塊狀型可分為單純塊狀型、融合塊狀型及多塊狀型。單純塊狀型,癌腫為單個腫塊,邊 界清楚或不規則,常有完整或不完整包膜,有的可無包膜,腫塊邊緣常可見小的衛星癌結節。 融合塊狀型,可見以癌塊為中心向周圍呈浸潤性生長,并與鄰近之大小癌結節。多塊狀型為 兩個以上的單塊或融合塊,本型約占原發性肝癌的30%,因多伴有肝硬化,預后較好。 3.結節型腫瘤為多數大小不等的結節,突出在肝臟表現,遍及全肝,多并發肝硬化。腫瘤 結節呈灰白色或灰黃色,也可呈棕紅色。本型可分為單結節型、融合結節型及多結節型。本 型約占全部肝癌的2/3,預后較差。 4.小癌型指癌腫直徑在5cm 以下(有人認為在3cm 以下),且為單個存在,一般有完整的 包膜,惡性程度低,基本上是早期肝癌。手術切除率高,預后好。 |
組織學分類 |
肝細胞癌 膽管細胞癌 混合型肝癌 纖維板層型肝癌 |